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    薄层色谱法检验操作规程
作者:admin  更新日期:2019-05-12 19:29    点击次数:
1  仪器与材料:
1.1  玻板:除另有规定外,用5cm×20cm, 10cm×20cm或20cm×20cm的规格,要求光滑、平整,洗净后不附水珠,晾干。
1.2  固定相或载体:最常用的有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254等。其颗粒大小,一般要求直径为10~40um。薄层涂布,一般可分无黏合剂和含黏合剂两种;前者系将固定相直接涂布于玻板上,后者系在固定相中加入一定量的黏合剂,一般常用10%~15%煅石膏(CaSO4·2H2O 140℃加热4小时),混匀后加水适量使用,或用羧甲基钠水溶液(0.5%~0.7%)适量调成糊状,均匀涂布于玻板上。也有含一定固定相或缓冲液的薄层。
1.3  点样器:微量注射器。
1.4  展开室:应使用适合薄层板大小的专用玻璃缸,并有严密的盖子,除另有规定外,底部应平整光滑,应便于观察。
2  操作方法:
2.1  薄层板制:备除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒在玻板上,倾斜玻板并使其充满整块玻板,轻轻振动使涂布均匀(厚度为0.2~0.3mm),将涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干后在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。
2.2  点样:除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边2.0cm,样点直径为2~4mm,点间距离约为1.5~2.0cm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。
2.3  展开:展开缸如需预先用展开剂饱和,可在缸中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与缸一样高、宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封缸顶的盖,使系统平衡或按正文规定操作。
将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.05~0.1cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封缸盖,待展开至规定距离(一般为10~15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。

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