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    正确评估免疫接种的效果
作者:bioob  更新日期:2016-08-08 08:47    点击次数:

    您的鸡群是否得到保护?这是家禽业主在讨论不同的家禽防疫程序(尤其是免疫程序)时常问的一个问题。肉鸡对疾病的抵抗力取决于众多因素的综合作用,这些因素包括:遗传性能、饲养管理、现场病毒的感染力及所用的免疫程序等等。因此,对某一个鸡群来说,单凭接种疫苗并不能保证不发病;同样的道理,一个鸡群没有发病并不能肯定地表示这些鸡群受到了保护。疫苗接种是帮助抵抗疾病的,然而有许多现场病毒能引起亚临诊感染的不良后果,如产生免疫抑制,这种免疫抑制将直接干扰鸡群对疫苗的免疫应答。所以免疫程序是否成功取决于对两个方面的完全保护,即抵抗疾病的发生和防止免疫抑制。
 
    保护是一个可变的定义
 
    今天在世界范围内,由于疫苗的广泛应用已改变了现场病毒的选择压,像在教科书中描述的很典型的临诊疾病正在减少,相应地"综合征"的发生率则显著地增加。这些综合征产生了"非传统的"临诊疾病形式,在现场观察时,这些"非传统的"临诊疾病形式很可能与典型禽病相混淆,最近WITTER和CO.就描述了鸡群由于感染了马立克氏病病毒(MDV)而产生了四种不同的综合征。
 
    另外一些免疫抑制性病毒,如传染性法氏囊病病毒(IBDV)、呼肠孤病毒(REOV)、传染性贫血病毒(CAV)和最近描述比较多的J型白血病(ALV-J)都能引起鸡群对另外一些病原微生物的易感性,并影响疫苗免疫的效果。在家禽中疾病发生的原因很少是由单一因素引起,而是由一种以上的因素同时相互作用所导致,这其中免疫抑制性病毒往往参与其中。一个典型的例子就是传染性法氏囊病病毒会影响鸡群对新城疫疫苗的免疫应答。
 
    详细评价鸡群免疫系统状态的方法在以前一个名为《商品家禽中免疫抑制主要作用:原因和后果》的增刊中进行了详细的讨论(Positive Action Publication Ltd.1999)。有不同的诊断方法来评价鸡群对疫苗的免疫应答能力,然而评估保护力的方法则总是在商品肉鸡中应用。
 
    血清学的价值
 
    任何一个免疫程序,第一步肯定是对免疫抑制因子的免疫,这关系到种鸡和后代两个方面,因为保护力是由母源抗体和肉鸡免疫引起的主动免疫共同作用的结果。所以,评价免疫程序一定要从种鸡群开始。在种鸡育成阶段一定要收集血样,以确定种鸡群对活疫苗和死疫苗都有合适的疫苗应答。
 
    种鸡群中传染性法氏囊病、传染性贫血和呼肠孤病毒的循环抗体水平一定要高,并且要持续到整个产蛋阶段,以确保循环抗体很好地传递给后代。
 
    在后代中查明母源抗体以及检测疫苗免疫后3周左右是否有免疫应答很重要。任何针对低日龄鸡群的血样所进行的血清学检测,对监测母源抗体的衰退是有意义的,但对控制和诊断疾病则没有太大的意义。对种鸡和肉鸡群进行血清学的监测,大多数是用于建立一个可对比操作的数据档案,查明在一定地区的环境条件下,特定的免疫程序的正常抗体值。一旦这个档案已经建立,比预期的抗体水平高或低的各种不同情况,就可用于诊断分析,尤其是那些抗体水平偏高的例子,往往与现存的疾病问题有关。
 
    抗体和呼吸道病疫苗的免疫应答
 
    血清学方法是检测呼吸道病疫苗免疫应答的有用工具。此外,抗体可能有一种"缓和"作用来减少疫苗反应,如有母源抗体的情况下对传染性支气管炎(IB)和肿头综合征(ART)就是这样一个例子。尽管母源抗体(被动免疫)会干扰疫苗应用的效果已早有报道,但1日龄的鸡就用疫苗来预防IB和ART的方法在许多国家普遍被采用并取得了很好的效果。另一些例子如传染性喉气管炎(ILT),循环抗体同保护力的关系非常小,保护力几乎都来自于细胞免疫。而新城疫,母源抗体是有保护力的,在设计免疫程序时应该将这个因素考虑进去。最常用的抗体监测技术是酶联免疫吸附试验(ELISA)、血凝抑制试验(HI)和琼脂扩散试验(AGP)。另外一些疫苗,如澳大利亚的热敏感霉浆体菌苗,快速平板凝聚试验是检测疫苗应答反应的最好方法。疫苗接种后缺乏应答反应通常表明存在疫苗的问题或接种方法的问题,鸡群应该再接受免疫。然而,检测疫苗免疫后对霉浆体抵抗力的最终方法是对接种鸡的气管SWAB进行PCR试验,来检测呼吸道器官是否存在MG的菌苗毒株。
 
    用血清学的方法评估免疫程序和疫苗传递系统
 
    抗体水平的测定是一个检测鸡群是否接种过疫苗和发生了免疫应答的很好方法。定期地进行检测对评估所用的疫苗传递系统也有用处,一些疫苗病毒,如传染性支气管炎病毒非常容易发生变化,在接种的过程中疫苗效价可能急剧下降。另一方面,对灭活疫苗的免疫应答依赖于剂量的多少,如果注射到鸡体内的疫苗量不一致,其结果抗体水平也同样会不平衡。
 
    血清学试验一定要与鸡群的免疫应答相符
 
    家禽对疫苗的免疫应答发生在疫苗接种后很短时间内,比常规实验室能够检测到的早。免疫应答是一个复杂的过程,涉及到有关细胞免疫或抗体(体液免疫)的局部免疫。局部免疫发生在粘膜表面,这种免疫应答能够在ELISA、HI或任何其他血清学方法最早能检测到抗体的迹象以前,即对鸡群提供保护。
 
    局部免疫应答对防治病原微生物的感染  非常重要。例如呼吸道病病毒,如新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎等,以及消化道的因素,如沙门氏杆菌等。不幸的是,检测那些保护机制所要求进行的活体攻毒实验,或其他特殊的检测方法并不能常规地像检测免疫程序那样普遍使用。对疾病的保护力尤其是对呼吸道疾病的保护力也许完全依赖于局部免疫,例如1日龄时进行新城疫的免疫,血样中可检测到的抗体将出现在3~4周龄左右,而鸡群在免疫后3~5天就对攻毒形成了保护,所以在某一个时间没有抗体并不意味着没有保护力,疫苗兔疫接种后最早产生的抗体常常是一种叫IgM 的免疫球蛋白。快速平板红细胞凝集试验(RPT)是检测lgM最敏感的方法,这种检测方法可以早至在霉浆体感染后几天即能检测到抗体反应。然而这种检测方法是不准确的,假阳性的结果可能会出现,鸡体中所产生的抗体紧接而来的是IgG,这是另外一种免疫球蛋白,通过HI和ELISA的方法可以检测到,其特异性更强但没有凝集试验敏感。快速平板凝集试验广泛应用于发现早期MG的感染,而HI则用于对RPT阳性的血样结果进行确诊。尽管保护力的结论不能依据抗体效价来得出,但通过血清学的试验可以获得一些有用的信息。应用何种检测方法将取决于免疫应答反应。RPT方法在疫苗接种或攻毒后检测应答的快速性上有优势,而另一些方法如HI或ELISA则只能用于疫苗接种或攻毒2~3周后血样的检测,因为它们所能检测到的抗体(IgG)需要更长的时间才能在血样中出现。琼脂扩散试验(AGP)用于检测抗体反应是一个简单而又便宜的方法,这是一个定性的试验,能表示特定抗体的出现。它广泛用于许多疾病的诊断,并且作为一个血清学调查的手段,在有些情况下可以帮助确诊通过另外一些方法所得到的阳性结果,一个很好的例子就是它可用来检查禽流感病毒(AIV)的抗体。灭活疫苗的免疫应答,尤其是后备鸡群对灭活疫苗的应答,也是疫苗评估中一个很重要的方面,尽管由于接种疫苗的家禽种类不同可能会有一些差异,但通常免疫应答的最高峰发生在疫苗接种后的4~6周间,应该在这时采集血样进行血清学检查。
 
    组织病理学及其他实验室技术的应用
 
    现场病毒的攻击将导致鸡体器官一定的变化,这些变化能够通过对器官组织采样进行组织病理学的检查得到证明。
 
    组织病理学结合血清学方法,这在家禽疾病的诊断中是专业的试验之一。这种试验方法检查组织病灶非常准确,病灶表示鸡体遭受现场病毒的感染,并且/或者鸡体缺乏保护力。如何收集样本一定要做好计划,及时跟踪鸡体组织的变化并观察鸡群中的问题,例如在评估由IBD或MD引起的法氏囊组织病灶时,重要的是评估头3周龄的损伤,几乎所有28天或以上天龄的法氏囊样本都能显示出病灶,但这种病灶与评估免疫程序的效果没有关系。
 
    传染性法氏囊病的保护力
 
    受传染性法氏囊病感染的鸡群生产效益差,这种情况是由于一定比例的鸡群呈病态和死亡率更高所致,尤其在后备鸡群。由于世界范围内VVIBD的出现,出现了更强的传染性法氏囊病疫苗应用的阶段,这些疫苗一定要认真地使用,因为不合适地应用将导致严重的免疫抑制,使得肉鸡缺乏保护。
 
    受IBD感染的鸡群生产效益与没有感染的鸡群相比更低,这已经得到证明。一般而言,传染性法氏囊病的经济影响使得该病的免疫成为任何一个免疫程序最主要的焦点。由于不同地区该病的病理学是不同的,所以我们应该考虑下述两种不同的情况:
 
    1.有VVIBD的国家。
 
    2.没有VVIBD的国家。
 
    在没有VVIBD的国家,种鸡传统的免疫程序普遍使用的是,在育成鸡阶段使用2~3次活毒疫苗,产蛋前和产蛋期间使用2~3次灭活疫苗,肉鸡可在1日龄使用一次活疫苗或在生长期使用二次中等毒力疫苗。另一种考虑是美国的例子,在美国特拉华变异株(Delaware variant)疫苗用于控制亚临诊IBD感染。存在VVIBD的国家,现场病毒甚至在有高母源抗体的情况下也能引起感染和致病,IBD的免疫程序对控制亚临诊的IBD常常没有效果。在这些国家已经成功地应用更强毒力的疫苗控制IBD疾病的爆发,中等偏强毒力的疫苗在美国以外的国家普遍使用,尤其在亚洲、欧洲和中东地区。一般而言,在这些国家可以通过两种方法来控制VVIBD,即使用中等偏强毒力疫苗或者同时应用活疫苗和灭活疫苗。上面提到的任何一个程序在完成之后,总有一个对抗现场病毒感染的保护力问题,什么是衡量保护力最有效的方法,目前仍有一些争论。对免疫过的鸡群或来源于高免疫种鸡群的雏鸡进行攻毒是最常用的方法。常常通过法氏囊器官的重量与体重的比例大小,或法氏囊的组织病理学变化来评估保护力的高低,但最近的研究证明,对雏鸡进行攻毒,在没有保护力的鸡群中,组织学的变化与法氏囊/体重的系数缺乏相关性。然而,完成这种试验要求特别的设备,需要耗费大量人力物力,另外攻毒试验要求在一定的控制环境中进行,并不能准确模拟鸡舍中情况。衡量IBD的免疫程序效果的最好方法,是没有临诊的、亚临诊的IBD的出现,以及鸡群由此而产生的优秀的生产成绩,这取决于所处地区的情况。有时感染鸡群观察不到临诊症状,但常常能观察到免疫抑制和由免疫抑制所引起的后果的最典型的症状,免疫抑制的出现可能导致呼吸道问题,呼吸道问题由于继发大肠杆菌的感染而变得复杂,这将带来肉鸡生产效益差的结果。
 
    如果IBD的免疫程序有效,主要的免疫抑制因素能得到控制,鸡群就能发挥出原有的生产潜能,这是传染性法氏囊病免疫程序成功的最好指标。
 
    保护意味着生产效益
 
    有许多不同的方法来评估鸡群对疫苗的免疫应答,这些方法不少是血清学的,而其他实验室技术像组织病理学、免疫组织化学也被应用。随着DNA技术的新发展,更加成熟的PCR试验也在家禽业中得到应用。PCR试验除了诊断应用外,已经成功地用于检测一些疫苗毒株如霉浆体活菌苗在鸡体中的出现。"保护"这个词同避免鸡群发病和肉鸡群优秀的生产成绩紧密地联系在一起。
 
    抗体和保护是两个不同的概念
 
    高的可检测到的抗体水平并不必然意味着保护,有时现场病毒能够突破母源抗体,如超强毒力的传染性法氏囊病病毒(VVIBDV)。当然血清学试验可以典型地表示抗体水平,但并不代表抗体的质量,由经典的IBD疫苗所诱导的高ELISA抗体将不能保护IBD变异株的攻毒。同样的道理也应用于IB,世界各地报道了许多IB的血清型,并且不同的血清型间交叉保护力很小。
 
    合理地解释种鸡的循环抗体和雏鸡的母源抗体,首先应该理解,高并且一致的抗体意味着所用的疫苗质量是合适的,鸡群也有合适的诱导抗体产生的能力,但对于保护力,它说明不了任何事情。真正的保护将在肉鸡的生产成绩中得到评估。(兽药界)

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